慢性不可预知应激（CUMS）模型构建及评价方案

 

抑郁症是一种高发性精神疾病，临床表现为快感缺失、动力不足、认知障碍及情绪低落。流行病学研究表明，遗传因素贡献约 40% 的抑郁症发病风险，剩余 60% 与环境因素密切相关，其中慢性应激是重要诱因之一。慢性不可预知应激模型（Chronic Unpredictable Mild Stress, CUMS）** 通过模拟长期复杂的环境压力，可诱导小鼠出现类似抑郁症的行为和生理改变，是目前抑郁症发病机制研究及药物干预评价的经典动物模型。

 

模型构建基本信息

 

1. 实验动物

品系：雄性 C57BL/6 小鼠，6~8 周龄，体重 20~25 g

饲养条件：SPF 级环境，温度（22±2）°C，湿度 50%±10%，自由摄食饮水（除禁食 / 禁水刺激日），造模期间单笼饲养以避免同伴干扰

 

2. 分组设计

正常对照组（Control）：不施加任何应激刺激，常规饲养

模型组（CUMS Model）：接受 6 周慢性不可预知应激刺激

阳性药组（Positive Drug）：模型成功后给予临床验证有效的抗抑郁药物（如氟西汀，10 mg/kg/d，灌胃）

受试药组（Test Drug）：设低、中、高三个剂量组（如 5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg，灌胃）

总计 6 组，每组 n=8~10 只

 

3. 实验周期

 

预适应期：1 周（熟悉环境，单笼饲养适应）

造模期：6 周（应激刺激阶段）

干预及检测期：造模结束后，药物干预 2 周并同步开展行为学检测

 

4. 建模方法

 

应激刺激库（9 种不同类型刺激）：

 

1.物理应激：

足部电击（1 mA，持续 1~10 s，间隔 1 min，总时长 1 h）

冷水游泳（4°C，5 min，捞出后擦干保暖）

尾巴夹刺激（尾部 1/3 处夹 5 min）

束缚应激（限制活动 6 h，通风透气束缚装置）

 

2.生理应激：

 

24 h 禁食（提供清水）

24 h 禁水（提供正常饲料）

 

3.环境应激：

 

昼夜颠倒（12 h 光照 / 12 h 黑暗周期反转，持续 24 h）

湿垫料刺激（垫料含水量≥70%，持续 24 h）

无垫料饲养（去除垫料，裸露笼底 24 h）

噪音刺激（85 dB 白噪音，1 h，随机时段施加）

 

刺激程序：

 

每周 7 天，每天随机选取2 种不同类型刺激组合施加，相邻 2 天避免重复相同刺激，确保应激的不可预测性；

前 3 天使用温和刺激（如禁食、昼夜颠倒、无垫料），第 4 天起逐步加入高强度刺激（如冷水游泳、电击、束缚），降低动物适应风险。

 

二、观测指标与模型评价

 

1. 一般状态观察

每日记录小鼠体重、摄食量、活动度、毛发状态及粪便形态，评估应激对生理状态的影响。

 

2. 核心行为学检测

 

检测项目	检测时间	评价指标	抑郁症相关表型
糖水偏爱实验	造模前（基线）、造模第 3/6 周、干预结束后	糖水消耗百分比 =（糖水消耗量 / 总液体消耗量）×100% 反映快感缺失（核心症状）	模型组糖水偏爱率显著低于对照组
旷场实验	造模第 6 周、干预结束后	总运动距离、中央区域停留时间 评估活动能力及焦虑样行为	模型组运动距离减少，趋向边缘区域
强迫游泳实验	可选补充检测	不动时间（反映绝望行为）	模型组不动时间显著延长

 

3. 统计学分析

数据以 “均值 ± 标准差（Mean±SD）” 表示，组间差异采用单因素方差分析（One-way ANOVA），两两比较用 Tukey’s 检验，显著性水平设定为P<0.05，极显著性P<0.001。

4. 典型实验结果（示例）

体重变化：造模 6 周后，模型组体重较对照组下降 15%~20%，差异极显著（P<0.001）；

 

糖水偏爱率：模型组糖水偏爱率较对照组降低 30%，差异显著（P<0.05）；

 

旷场运动距离：模型组总运动距离较对照组减少 25%，差异显著（P<0.05）。

 

三、注意事项

 

动物伦理：

应激刺激强度需符合动物伦理规范，避免不可逆损伤（如电击强度≤1 mA，冷水游泳后及时保暖）；

单笼饲养期间定期检查动物健康状态，排除疾病或创伤导致的非应激性异常。

 

应激刺激标准化：

严格按照随机顺序组合刺激，避免人为偏倚；

记录每日施加的刺激类型及时间，确保实验可重复性。

 

个体差异控制：

选择同批次、体重相近的雄性小鼠（雌性小鼠需考虑动情周期影响）；

行为学检测在固定时间段（如上午 9:00~12:00）进行，减少昼夜节律干扰。

 

模型验证：

建议结合生化指标（如 HPA 轴激素、脑内神经递质）或组织病理学检测（如海马神经元形态），多角度验证模型有效性。

 

四、模型优势与局限性

 

优势：模拟临床抑郁症 “慢性、不可预测” 的应激特点，行为学表型与人类抑郁症高度相似，适用于抗抑郁药物筛选及发病机制研究。

 

局限性：个体应激反应存在差异，需通过增加样本量或结合基因筛选提高模型稳定性；长期应激可能引发非特异性生理损伤，需与病理检测结合排除干扰。

 

动物实验服务平台
实验动物代养服务	动物饲养	1.屏障环境饲养 ：1）屏障环境饲养-小鼠 2）屏障环境饲养-大鼠 3）屏障环境饲养-豚鼠 4）屏障环境饲养-地鼠 5）屏障环境饲养-兔2.普通环境饲养 1）普通环境饲养-犬 2）普通环境饲养-猪 3）普通环境饲养-猴 3.一站式实验操作服务 1）给药服务（注射给药：静脉、腹腔、皮下、皮内、肌肉。消化道给药：灌胃、自由摄取、十二指肠、直肠。其他部位给药：呼吸道、皮肤、脑内、关节腔内、脊髓腔内、滴眼、生殖器等。"2）脏器、组织取样服务：脏器、腺体、淋巴结、骨及软骨、肌肉、肿瘤组织、脑组织、脂肪组织等。3）体液样本采集：血液（眼睑采血、剪尾采血、心脏采血）、尿液、脑脊液、胆汁、腔液。4）其他实验操作观察、拍照、称重、滴鼻、剪尾、人工肿瘤测量、解剖等。
动物模型构建	心脑血管模型	脑缺血及再灌注模型/心脏骤停模型/脑外损伤动物模型/体内血栓动物模型/高血压模型/心力衰竭模型/心肌缺血动物模型/心梗动物模型/阿霉素诱导大鼠心肌病模型/脑损伤动物模型/脑出血动物模型/慢性心力衰竭动物模型/高血压动物模模型/动脉粥样硬化动物模型
	神经系统+精神科模型	应激模型/帕金森动物模型/栓塞性脑梗死模型/老年痴呆模型/脊髓损伤动物模型/抑郁症模型/坐骨神经损伤 （周围神经损伤）动物模型/坐骨神经，面神经损伤动物模型/抑郁症动物模型/癫痫模型
	呼吸系统模型	肺栓塞模型/慢性肺阻塞模型/肺炎模型/过敏性哮喘动物模型/慢性支气管炎动物模型/肺动脉高压动物模型/肺纤维化模型/急性肺损伤模型/肺间质纤维化动物模型/慢性支气管炎动物模型
	消化系统模型	结肠炎(UC)模型/大肠癌动物模型/胃酸分泌模型/胃溃疡模型/急性肝损伤模型/胆结石动物模型/肝炎-肝硬化-肝癌动物模型/肥胖动物模型/非酒精性脂肪肝模型/脓毒症模型/肠炎动物模型/胰腺炎动物模型/肝硬化动物模型/肝纤维化动物模型/酒精肝动物模型
	皮下移植瘤药效模型	Mouse皮下移植瘤/Mouse皮下移植瘤（只成瘤）/裸鼠皮下移植瘤/裸鼠皮下移植瘤（只成瘤）
	原位瘤模型	肾癌动物模型/裸鼠腹水瘤/裸鼠乳腺癌原位瘤/裸鼠肝原位瘤药效评估/脑胶质瘤动物模型/胃癌动物模型/胰腺癌动物模型/卵巢癌动物模型/肝癌动物模型/直结肠癌动物模型
	肿瘤动物模型	裸鼠成瘤/裸鼠肝原位瘤/黑色素瘤动物模型/药理毒理动物实验技术服务/Mouse肺转移瘤/人源肿瘤裸鼠药效评价/Mouse皮下移植瘤药效评估/裸鼠皮下移植瘤药效评估/Mouse肝原位瘤/肺癌动物模型/乳腺癌动物模型
	动物行为学	Light/dark box（黑白箱实验）/高压氧舱/足底热痛仪/强迫游泳/跑台实验/大小鼠心电图/平衡木训练/热板/旋转杆实验/旷场实验/大小鼠条件性恐惧/网屏训练/转棒训练/Y迷宫/社交互动（自我捋毛，筑巢、少年玩耍，实物埋藏等）/高空十字架/避暗穿梭/水迷宫
	免疫、代谢系统模型	高尿酸血症模型/宫颈癌动物模型/糖尿病眼病模型/高尿酸血症动物模型/亢甲状腺药物诱导的甲减模型/II型糖尿病动物模型/1型糖尿病动物模型
	骨科模型	类风湿性关节炎动物模型/骨缺损动物模型/骨折动物模型/骨关节炎动物模型/骨质疏松动物模型
	泌尿系统模型	缺血性急性肾衰竭动物模型/子宫内膜异位症模型/肾小管间质纤维化动物模型/膀胱癌动物模型/肾结石动物模型/慢性肾衰竭动物模型/急性肾衰竭动物模型/肾盂肾炎动物模型
	五官疾病模型	鼻窦炎模型/鼻炎模型/视网膜损伤模型/牙周炎动物模型/白内障动物模型/视神经损伤动物模型
	皮肤科模型	压力性褥疮（PU）模型/硬皮症（SSC）模型/特应性皮炎（AD）模型/伤口愈合：圆形缺损模型/伤口愈合：划痕模型/二度烧伤模型/皮肤损伤模型
	转移瘤药效模型	裸鼠肺转移瘤药效评估/裸鼠肺转移瘤
	常规脏器手术切除模型	5/6肾切除手术/有创动脉血压/神经吻合手术/输精管结扎手术/去势手术（睾丸摘除）/胃切除手术/肝切除手术/单侧肾切除手术
	动物影像学	活体成像/全身骨密度检测/X-ray光/超声成像/大小动物CT